姬姆萨染色液标准的染色流程（以“外周血涂片”为例）
姬姆萨染色液的操作流程简单，但需严格控制“染色时间、pH值”，才能获得理想效果，具体步骤如下：
样本制备：
取新鲜外周血1滴（约5μL），滴在干净载玻片一端，用另一载玻片呈45°角推片，形成“薄而均匀的血膜”（血膜厚度以“透过血膜可看清报纸文字”为宜）；
将血涂片置于室温下自然晾干（避免加热干燥，防止细胞形态变形）。
固定（关键步骤）：
将晾干的血涂片放入纯甲醇中固定5-10分钟（甲醇可使细胞蛋白变性，保持形态稳定，同时助溶染料）；
取出涂片，室温晾干（固定不充分会导致染色时细胞脱落）。
染色液稀释：
按“姬姆萨原液：磷酸缓冲液（pH6.8）=1:10”的比例稀释染色液（如1mL原液+9mL缓冲液），充分混匀（稀释比例可根据染色效果调整，原液浓度高则稀释比例可加大）。
染色：
将稀释后的染色液均匀覆盖在血涂片上，室温染色15-20分钟（染色时间过短则颜色浅，过长则背景深）；
染色过程中避免染色液干涸（可适当补加少量稀释液）。
水洗与晾干：
染色结束后，用“缓慢流动的自来水”轻轻冲洗涂片（避免水流过急冲掉细胞），直至涂片背景呈“淡粉色”；
垂直放置涂片，室温自然晾干（或用滤纸吸干边缘水分，避免摩擦血膜）。
镜检：
用光学显微镜观察：先在低倍镜（10×）下找到血膜均匀区域，再换高倍镜（40×）或油镜（100×）观察细胞形态（细胞核呈紫蓝色，细胞质呈粉红色，红细胞呈淡粉红色）。
