SB-C18液相色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照液相色谱柱出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。
SB-C18液相色谱柱核心技术参数:
1、键合相:C18(十八烷基)
2、颗粒类型:全多孔球形硅胶
3、粒径:1.8 / 3.5 / 5 / 7 μm
4、孔径:80 Å(300SB-C18 为 300 Å,专G蛋白 / 多肽)
5、比表面积:180 m²/g
6、pH 范围:0.8 – 8.0
7、温度上限:90 °C
8、碳载量:~10%
9、封端:无(空间保护型键合,无需封端)
10、USP 分类:L1
11、耐压:普通 HPLC 400 bar;RRHD 版 1200 bar(适配 UHPLC)
SB-C18液相色谱柱的选择一般基于分离规模、分析物的性质、色谱柱规格和填料的性质几个原则。
1、根据分离规模确定选择分析型色谱柱还是制备型色谱柱;
2、根据分析物的pKa、log P值、分子量、化学结构等确定其溶解性,确定合适的分离模式和色谱柱;
3、色谱柱确定后,根据色谱柱柱长和内径对于分离的影响选择合适的柱长和内径;
4、根据填料的基质——粒径、孔径、比表面积,硅胶纯度、颗粒形状、机械强度,键合相、键合密度、封端等情况确定合适的色谱柱,即完成SB-C18液相色谱柱的选择。
