免疫染色洗涤液是免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)和免疫细胞化学(IC)等实验中一抗或二抗孵育后的关键洗涤步骤，适当的洗涤可以降低背景、增强信噪比。 一、稀释配制
1、10×浓缩液的稀释方法：
取一瓶免疫染色洗涤液(10×)，倒入洁净的量筒中，加入去离子水或蒸馏水混匀并定容到1升后即为免疫染色洗涤液(1×)。例如，100mL的10×浓缩液可配制成1L的1×工作液。
2、保存条件：
- 10×浓缩液：4℃保存，有效期1年
- 1×工作液：4℃保存，1-2个月内用完；室温保存宜在1-2周内用完
- 注意：一旦启用后建议在2周内用完，避免细菌污染
二、使用步骤
标准洗涤流程：
1、在固定、一抗或二抗孵育结束后，加入适量免疫染色洗涤液(1×)，使之能覆盖样品
2、在摇床上缓慢摇动洗涤5分钟
3、吸尽洗涤液，再加入新的洗涤液洗涤
4、共洗涤3次，每次5分钟
5、进行后续操作
特殊情况处理：
- 如果摇动容易导致样品脱落，可以不摇动浸泡洗涤，但需延长洗涤时间至8-10分钟/次，增加洗涤次数至4-5次
- 如果背景仍然较高，可继续增加漂洗时间和次数，通常延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对免疫染色结果产生负面影响
三、注意事项
1、动作轻柔：所有操作动作要尽量轻柔，避免用力吹打细胞，防止样品脱落
2、避光操作：荧光染料标记的抗体孵育后需避光保存
3、避免污染：本产品经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染
4、及时使用：一经开启尽快用完，储存过久的液体固定效果易下降
5、温度控制：尽量在4℃下操作，保持实验环境稳定
四、产品特点
免疫染色洗涤液中含有适量Triton X-100，可以通透细胞膜，经处理的细胞样品可以检测细胞内的目的蛋白，包括细胞浆内和细胞核内的目的蛋白。按照每组样品洗涤需要0.1-1mL计算，100mL的10×浓缩液可以洗涤1000-10000个样品。
