赛默飞CountessIII/FL全自动细胞计数仪,凭借明场与荧光双通道成像、自动聚焦及快速分析能力,可高效完成细胞计数、活率检测及荧光标记细胞分析,操作流程标准化、易上手。
一、仪器准备
开机后,仪器完成自检,主界面选择“Default”默认模式,确认适配一次性或可重复使用载玻片的支架安装到位。若进行荧光计数,提前安装对应EVOS光立方(如GFP、RFP模块),重启仪器完成识别。
二、样本制备
取10μL细胞悬液与10μL0.4%台盼蓝染液,充分混匀(明场活率检测);荧光样本则按实验要求用对应荧光染料染色。取10μL混合液,缓慢加入Countess专用计数载玻片加样孔,避免气泡产生,静置30秒使细胞均匀沉降。
三、上机计数
将载玻片平稳插入仪器样品槽,卡入到位后,仪器自动触发自动聚焦。明场模式直接点击“Count”开始计数;荧光模式先选择对应荧光通道,再启动计数。仪器10-30秒内完成图像采集、细胞识别与数据分析,自动排除碎片干扰。
四、结果查看与优化
计数完成后,屏幕显示总细胞数、活细胞数、活率、平均细胞直径及浓度。可通过“Gating”功能,按细胞大小、亮度、圆度微调设门参数,剔除杂质,优化计数准确性;点击直方图图标,查看细胞群体分布。
五、数据保存与导出
确认结果无误后,点击保存按钮,可将数据以CSV格式、图像以PNG/TIFF格式保存至U盘,或通过Wi-Fi上传至ThermoFisherConnect云端,也可生成PDF报告用于实验记录。
六、仪器清洁与关机
取出载玻片,用无尘布擦拭样品槽及载物台,避免残留样本污染。关闭软件界面,正常关机,完成单次计数操作。
需要我把这份流程整理成一页可直接打印的SOP操作卡,方便贴在仪器旁快速查阅吗?