试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂每个反应加入的量N个反应加入的量
荧光PCR反应液14µL N×14µL
酶混合物1µL N×1µL
总量15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环50℃for 2 min
预变性1循环95℃for 10 min
PCR扩增40循环95℃for 15 sec
60℃for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
实验注意事项：
1、RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2、客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3、客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4、样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
