在高效液相色谱（HPLC）与超高效液相色谱（UHPLC）分析中，
4.6x20柱管守护着昂贵的分析柱，拦截样品中的颗粒物、强保留杂质与基质成分，延长主柱寿命，保障分离效果的稳定性。然而，不当使用不仅无法发挥其保护作用，反而可能引入死体积、增加背压，甚至污染系统。掌握科学、规范的使用方法，是让4.6x20柱管提升色谱系统整体性能的关键。
一、选型匹配
固定相匹配：
预柱填料必须与分析柱一致（如C18），避免因化学性质差异导致峰形畸变或保留时间漂移。
粒径与孔径匹配：
预柱粒径（如5μm）应≤分析柱粒径，孔径（如120?）相同，确保流动相与样品兼容。
柱规格选择：
内径：通常2.1mm或4.6mm，与分析柱匹配；
长度：10-20mm，过长增加背压，过短保护不足。
二、安装规范
位置选择：
安装于自动进样器与分析柱之间，确保所有样品先经预柱过滤；
若使用柱温箱，预柱应与分析柱同温。
连接方式：
使用零死体积接头或预柱卡套，避免产生额外死体积，影响峰形；
接头拧紧力度适中，防止过紧损坏螺纹或过松导致泄漏。
方向确认：
预柱有明确流向标记（→），必须与流动相方向一致，不可反接。
三、使用前活化
目的：
去除预柱内保存液（通常为有机相），润湿填料，确保良好润湿性。
步骤：
以低流速（如0.2mL/min）用强溶剂（如甲醇或乙腈）冲洗10-15分钟；
再用初始流动相平衡15-30分钟，直至压力稳定、基线平稳。
四、样品处理
样品前处理：
所有样品必须经0.22μm或0.45μm滤膜过滤，去除颗粒物；
复杂基质（如血清、组织提取液）建议进行蛋白沉淀、液液萃取或SPE净化，减少强保留杂质。
进样量控制：
避免超载，通常≤20μL，防止预柱过早饱和。
