大肠杆菌表达重组蛋白的检测需结合多维度分析技术，构建从表达效率到功能活性的完整质量评估体系。大肠杆菌（Escherichiacoli）作为一种常用的重组蛋白表达系统，因其生长速度快、培养条件简单、遗传改造容易等优点，被广泛应用于分子生物学和生物制药领域。在使用大肠杆菌进行重组蛋白表达时，需要通过一系列检测方法来评估蛋白的表达水平、纯度及功能。以下是几种常见的检测方法：
SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）
SDS-PAGE是一种常用的分析蛋白分子量和纯度的方法。该方法通过在凝胶中分离不同大小的蛋白质，并利用SDS使蛋白质负载均匀，按分子量进行迁移。染色后，目标蛋白通常表现为条带，根据条带的迁移速度，可以推测其分子量，并与标准蛋白进行对比，确认重组蛋白的表达。
WesternBlot（免疫印迹法）
WesternBlot技术在SDS-PAGE的基础上，进一步通过特异性抗体识别目标蛋白。这一过程首先将蛋白质转移至膜上，然后用目标蛋白的抗体进行孵育，之后通过化学发光或比色法显现出特定条带，从而确认目标蛋白的表达。这种方法具有高度的特异性，能够识别正确折叠的蛋白，且对低丰度蛋白的检测也很有效。
ELISA（酶联免疫吸附试验）
ELISA是一种通过抗原与抗体反应产生颜色变化来定量检测目标蛋白的常用方法。它适用于对大量样本的快速筛选，且具有较高的灵敏度。ELISA可以用于定量检测重组蛋白的浓度，通过测定反应体系的吸光度变化来判断蛋白的含量。
酶活性测定
对于表达酶类重组蛋白，酶活性测定是验证其功能的重要方法。通过检测底物的转化产物，能够评估酶的活性，从而确认重组蛋白是否具有预期的生物学功能。这种方法非常适合应用于酶学研究和药物开发中。
质谱分析
质谱分析可以提供精确的分子量信息，并帮助确认重组蛋白的氨基酸序列及其修饰状态。它能够在分子层面上分析蛋白的结构和功能性修饰，常用于蛋白的进一步表征，确保蛋白的正确折叠和功能。
