试剂三：自备无水甲醇和*，依次加入27 mL无水甲醇和3 mL*，盖紧混匀即可；

　　标准液：2μmol/mL CaCl2溶液，临用前用蒸馏水进行10倍稀释得到0.2 μmol/mL标准溶液，即吸取50μL标准溶液和450μL蒸馏水混合。

　　产品说明：血钙几乎全部存在于血浆中，所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式，其中只有离子钙直接起生理作用，它与结合钙处于动态平衡，并受血液pH的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关，过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。在强碱溶液中游离钙与GBHA反应生成红色钙-GBHA复合物，在520nm有吸收峰；通过测定520nm吸光度，计算游离钙浓度。技术指标：低检出限：0.011 μmol/mL线性范围：0.025-1 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品：可见分光光度计、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、无水甲醇、*和蒸馏水。操作步骤：“具体操作步骤详见“产品资料”附件”实验实例：

　　取小鼠血浆按照测定步骤操作，测得计算A测定管=0.608，A空白管=0.112，A标准管=0.316，计算含量得：

　　血钙含量(μmol/dL)=20×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)=48.63 μmol/dL。相关发表文献：

　　Cao W, Su Y, Liu N, et al. Role of Ca2+ in Inhibiting Ischemia-Induced Apoptosis of Parathyroid Gland Cells in New Zealand White Rabbits[J]. Medical Science Monitor: International Medical Journal of Experimental and Clinical Research, 2020, 26: e920546-1.