进口elisa试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中AIF水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入AIF抗原、生物化的抗小鼠AIF抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的AIF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
需要而未提供的试剂和器材:
1.进口elisa试剂盒酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
试剂盒性能:
1.灵敏度:小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2.特异性:不与其它细胞因子反应。
3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
完整的elisa试剂盒主要的组成成份如下:
1、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
2、C的抗原或抗体(结合物);
3、酶的底物;
4、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
5、结合物及标本的稀释液;
6、洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
7、酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的终体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。